摘 要:目的觀察內(nèi)毒素/脂多糖(LPS)致傷小鼠肺組織中Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)的表達(dá)變化和細(xì)胞定位。
方法 腹腔注射LPS制備小鼠內(nèi)毒素肺損傷模型,依據(jù)注射時相和劑量不同隨機分組。用Real-time PCR法和Western blot法檢測各組肺組織SSeCKS的mRNA和蛋白質(zhì)水平表達(dá)情況,間接免疫熒光雙標(biāo)法檢測SSeCKS在肺組織中的細(xì)胞定位。
結(jié)果 SSeCKS表達(dá)水平與LPS用量呈現(xiàn)劑量和時間依賴關(guān)系:1、5、10和15 mg/kg組SSeCKS mRNA水平皆顯著高于對照組(P<0.05),且隨注射劑量增高SSeCKS mRNA表達(dá)量亦逐漸增高;不同時相LPS(5 mg/kg)注射后肺組織中SSeCKS mRNA水平表達(dá)呈動態(tài)變化過程,1 h開始增高,3 h達(dá)到表達(dá)高峰,12 h降至正常水平;SSeCKS蛋白水平表達(dá)變化與mRNA水平變化相一致。SSeCKS在肺組織中定位于肺泡間隔毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞。
結(jié)論 SSeCKS是炎癥反應(yīng)蛋白,其表達(dá)量與炎癥的嚴(yán)重程度相關(guān)。內(nèi)毒素可誘導(dǎo)肺泡間隔毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞SSeCKS表達(dá)上調(diào)。