酶標記親和素-生物素技術方法的基本原理:
1.標記親合素-生物素法(LAB法):將親合素與標記物(HRP)結(jié)合,一個親合素可結(jié)合多個HRP;將生物素與抗體(一抗與二抗)結(jié)合,一個抗體分子可連接多個生物素分子,抗體的活性不受影響。細胞的抗原(或通過一抗)先與生物素化的抗體結(jié)合,繼而將標記親合素結(jié)合在抗體的生物素上,如此多層放大提高了檢測抗原的醫(yī)學教育|網(wǎng)搜集整理敏感性。
2.橋連親合素-生物素法(BAB法):先使抗原與生物素化的抗體結(jié)合,再以游離親合素將生物素化的抗體與酶標生物素搭橋連接,也達到多層放大效果。
3.親合素-生物素-過氧化物酶復合物法(ABC法);此法是前兩種方法的改進,即先按一定比例將親合素與酶標生物素結(jié)合在一起,形成親合素-生物素-過氧化物酶復合物(ABC復合物),標本中的抗原先后與一抗、生物素化二抗、ABC復合物結(jié)合,最終形成晶格樣結(jié)構(gòu)的復合體,其中網(wǎng)絡了大量酶分子,從而大大提高了檢測抗原的靈敏度。