隨著生物化學、細胞生物學、免疫學、遺傳學的飛速發(fā)展,止血與凝血和血栓性疾病的研究,無論在基礎理論,或在臨床應用均取得了巨大進步。特別是分子水平的研究不僅使人們對凝血過程和血栓形成的本質(zhì)有了更為深刻的認識,也使疾病的診斷方法、藥物檢測手段及血栓病的防治措施層出不窮,如今止血與血栓的研究已遠遠超過以往出血性疾病的范疇涉及到臨床各科。面對基礎醫(yī)學和臨床醫(yī)學蓬勃發(fā)展的今天,積極開展血栓與止血試驗檢測,推廣臨床應用,無凝且有重要的意義。
血栓的形成及調(diào)節(jié)主要與血管、血小板、凝血因子及血液流變有關。它們通過本身促凝或凝作用,組成了血液內(nèi)存在復雜、功能對立的凝血系統(tǒng),而這兩個系統(tǒng)通過機體的生理調(diào)節(jié)又保持著動態(tài)平衡,使得生理狀態(tài)下血液在血管中不斷地流動循環(huán),即不溢出于血管 之外(出血),又不凝固于血管之中(血栓形成)。一旦此種平衡遭破壞,則可導致各種出血表現(xiàn)或血栓形成。止血與血栓試驗的目的就是通過各種因子的檢測 從不同的側(cè)面、不同環(huán)節(jié)了解發(fā)病原因、病理過程,進而進行疾病的診斷和治療。迄今在醫(yī)院檢驗用于臨床診斷的試驗大致分為兩部分,即篩選試驗和確認試驗 。前者主要是常規(guī)中較簡易、快速、費用低廉的試驗。根據(jù)檢測結(jié)果初步分析血栓的形成或出血病因。后者的目的是根據(jù)初篩的結(jié)果進一步探討病因和病理變化以確定診斷。這些試驗較特異步驟繁瑣、費用亦較高。目前國內(nèi)用于篩選的試驗 有;出血時間(BT)、血小板計數(shù)(PLT)、血小板平均體積(MPV)、部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶原時間(PT)、纖維蛋白原定量(FG)、纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物(FDPS)和D二聚體(D-DIMER)、測定。用于確診的試驗 有;(1)診斷血管病變;血管性假性血友病因子(VWF)、血漿內(nèi)皮素-1(ET-1)、血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)、等因子的檢測。(2)用于 血小板功能的估計;血小板聚集試驗(PAFT)、血小板粘附試驗(PADT,特別是應用于血小板功能 儀檢測)、血小板顆粒釋放蛋白(GMP-140)、血栓烷B2。(3)凝(抗凝)血因子分析; 等因子活性及含量分析,凝血酶原標志物(凝血酶原片段F纖維蛋白質(zhì)原片段A肽、B肽、凝血酶-抗凝血酶復合物、纖維蛋白質(zhì)單體測定)。(4)纖溶系統(tǒng)檢查;組織型纖溶酶原激活物(T-PA)、纖溶酶原激活物抑制物(PAL)、纖溶酶原活性及纖溶酶-抗纖溶酶復合物等。近幾年先進儀器在檢驗醫(yī)學的應用于,使檢測 方法進入了新階段,如利用流式細胞儀檢測血小板膜蛋白質(zhì)、血漿內(nèi)各種凝血因子抗體,使用分子生物學技術(shù)進行遺傳病的診斷,甚至用激光共聚集顯微鏡察不同病理過程血小板中鈣高子濃度、鈣流及鈣波動,進一步研究止血與血栓疾病的病理生理及藥物作用機制,儀器昂貴及試劑的限,這些方法目前更適合試驗室研究。 止血與血栓這個邊緣學科令人矚目的進展使其實驗方法學的研究在臨床工作中雎有重大的實用價值,這些試驗主要用于;(1)出血性疾病的診斷(如血友病,血小板病等)。(2)易栓前狀態(tài)的分析。(3)彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)的實驗診斷。(4)藥物治療的監(jiān)測(抗凝治療、溶栓治療抗血小板治療降纖治療)及手術(shù)前檢查。由于血栓形成是動態(tài)的,血栓形成時凝血與抗凝血之間相互調(diào)節(jié),同一實驗指標在同一病人不同病和其結(jié)果是不同,比如DIC早期,PT縮短,纖維蛋白原含量增高,熔栓試驗(3P)陽性,而至病和后期PT延長,纖維蛋白質(zhì)原減少,3P陰性。因此合理選擇試驗項目,正確分析實驗結(jié)果是非常重要的。應該注意以下幾個問題; 1加強實驗室與臨床的信息交流,止血與血栓理論涉及學科較多,其方法學日新月異由于醫(yī)務人員知識的日益專一化,臨床醫(yī)生不可能對各項試驗都有深刻的了解,這就要求實驗室與臨床有經(jīng)常性的緊密的學術(shù)交流、信息溝通,不斷地向臨床介紹所開設試驗各方面資料,使臨床醫(yī)生對每項試驗原理、結(jié)果分析、臨床意義及其質(zhì)量控制有較深入的了解,而實驗室工作人員結(jié)合從醫(yī)生那里獲得臨床診斷、治療方案、藥物劑量、病人生理、病理狀態(tài)及其它檢查結(jié)果,便于進行全面質(zhì)量控制,進一步評價自已實驗的工作、總結(jié)經(jīng)驗和進行科研。 2血栓性疾病理變化是動態(tài)的,為診斷所設計的實驗針對不同病理環(huán)節(jié)。為此應根據(jù)病人臨床表現(xiàn)和病理合理選擇實驗,反之檢查結(jié)果需要結(jié)合臨床綜合分析及評價。 3目前診斷血栓實驗的參考值均有較大的生理 波動范圍,個體之間差異亦較大,某些原發(fā)病也影響凝血指標,因而某些患者第一次檢查結(jié)果對群體來說是在正常范圍,但對此患者已是明顯變化的異常值,所以有些實驗項目一次檢查站結(jié)果不能輕率定論,動態(tài)觀察可能更早發(fā)現(xiàn)病情。這一點對于DIC的早期診斷成尤為重要。 4凝血試驗 繁多,選擇項目時一定要注意先篩查,再有的放矢地選擇確認實驗,并力求簡單、快速、先易后難,切忌不顧病人醫(yī)療負擔,無目的地"大撒網(wǎng)"地檢查。 質(zhì)量控制是保證實驗結(jié)果準確的重要措施,由于凝血因子檢測可受多種因素干擾,加強試驗的全面質(zhì)量控制方法的標準化對血栓和止血試驗 尤為重要,其內(nèi)容包括,標本的采取與保存、試劑的應用、儀器的校正與監(jiān)控和實驗技術(shù)四個方面。總的來說,應采取以下質(zhì)量措施;(1)用兩管法小心采血,使用塑料管或硅化管和大號針頭。止血帶的壓力盡可能小,壓力大或束 時間長可造成局部血液濃縮和T-PA釋放引起纖溶及血小板活性增強。(2)用密封塑料管存放血漿,并在內(nèi)4小時內(nèi)進行測定。檢測 因子血漿要員80保存。(3)4小時內(nèi)不能測定。的血漿冷凍儲藏。(4)血液標本用 枸櫞酸鈉抗凝。應注意血與抗凝劑的比例。對嚴重貧血或紅細胞壓積明顯增高的血液應調(diào)整調(diào)整抗凝劑的用量。(5)嚴格按照廠家的說明書儲存、使用產(chǎn)品。把反應溫度維持 檢查測定中試劑的PH值和濃度。不要把血漿置于37 條件下超過10分鐘,凝血活酶或部分凝血活酶不應超過廠家規(guī)定時間。(6)合理地設計試驗步驟,減少觀察者誤差和時間趨勢。(7)所有樣本均采用復管測量,每天都做好質(zhì)控。(8)每個分析項目都有要建立本試驗室參考值。(9)根據(jù)檢查站目的,選擇最敏感的試劑,比如應用血小板聚集實驗監(jiān)測口服阿斯匹林用量就要用花生四烯酸做誘導劑 ,而監(jiān)測抵克得得要用二磷酸腺 作誘導劑,監(jiān)測口服華發(fā)林抗凝藥時,PT要用國際標準化比率報告方式。 綜上所述,隨著多學科的發(fā)展,止血與血栓試驗診斷將在血栓性疾病及相關疾病的診治中發(fā)揮越來越重要的作用,積極深入開展這方面的研究與臨床應用有著重要的意義,相信臨床與實驗室緊密配合相互促進,定將我國此方面工作的學術(shù)水平提高到新階段。