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細(xì)胞周期的DNA檢測(cè)

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 ?、瘛悠窚?zhǔn)備:準(zhǔn)備以下一種或幾種樣品。

  A、組織單細(xì)胞懸浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盤細(xì)胞)

  B、組織培養(yǎng)細(xì)胞

  C、Ficoll-hypaque分離的單核細(xì)胞

 ?、?、反應(yīng)體系-DNA低滲緩沖液

  檸檬酸三鈉 0.25g

  Triton-X 100 0.75ml

  Propidium iodide 0.025g

  核糖核酸酶 0.005g

  蒸餾水 250ml

  我們將該DNA低滲溶液于密閉瓶子中存放數(shù)月后并無發(fā)現(xiàn)有任何染色活性的丟失Ⅲ、染色

  1、每一個(gè)管子中放入1×106個(gè)細(xì)胞;

  2、樣品離心后盡可能完全地移去上清液,并且不要打碎沉淀塊;

  3、入1ml的DNA低滲染色緩沖液至沉淀中,并混勻;

  4、樣品于4℃下避光30分鐘或最長(zhǎng)不超過1個(gè)小時(shí)以備流式細(xì)胞儀分析。

  注意:延長(zhǎng)在低滲緩沖液的曝光時(shí)間會(huì)引起樣品碎片的增加。

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