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基因工程菌株的培養(yǎng)與觀察

2011-07-15 14:38 醫(yī)學教育網(wǎng)
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  大腸桿菌是含有長約3000Kb的環(huán)狀染色體的棒狀細菌,它能在僅含碳水化合物(如葡萄糖,提供碳源和能量)和提供氮、磷、微量元素的無機鹽的極限培養(yǎng)基上快速生長。如果用含氨基酸、核苷酸前體、維生素以及其它一些細菌不能合成的代謝成分的豐富培養(yǎng)基來培養(yǎng),那么大腸桿菌會生長的更快。大多數(shù)應用于DNA重組技術的細菌是大腸桿菌K-12株的衍生菌株。

  當大腸桿菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)時,其開始裂殖前,先進入一個生長滯后期。在豐富培養(yǎng)基中,它能在20-30min內復制一代,這種指數(shù)生長相稱之為對數(shù)期。最后,當培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分和氧耗盡或當培養(yǎng)基中廢物的含量達到抑制細菌的快速生長的濃度時,菌體密度就達到一個比較恒定的值。在通常的實驗室培養(yǎng)中,在這一時期的細胞密度一般為1*109~2*109ml,細胞停止迅速分裂。這就是細菌生長的飽和期,而所謂的新鮮飽和即指當培養(yǎng)液中細胞密度剛到達這一水平。

  培養(yǎng)特征是指微生物在培養(yǎng)基上所表現(xiàn)的群體形態(tài)和生長情況。細菌培養(yǎng)特征的常規(guī)檢驗包括平面上的菌落特征,液體培養(yǎng)時的生長特征以及斜面培養(yǎng)上的菌苔特征。菌落是個體微生物在固體培養(yǎng)基上生長繁殖成的肉眼可見的群落。在一定的培養(yǎng)條件下,不同的細菌形成的菌落形狀是不一樣的醫(yī)學`教育網(wǎng)搜集整理。

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