(1)鹽酸-鎂(或鋅)粉試驗:取檢品的乙醇溶液1ml,加放少量鎂粉(或鋅粉),然后加濃鹽酸4-5滴,置沸水浴中加熱2-3分鐘,如出現(xiàn)紅色示有游離黃酮類或黃酮甙(以同法不加鎂或粉做一對照,如兩管都顯紅色則有花色素存在。如繼續(xù)加碳酸試液使成堿笥即變成紫色雙轉(zhuǎn)變?yōu)樗{色,即證明含花色素)。
黃酮類的乙醇溶液,在鹽酸存在的情況下,能被鎂粉還原,生成花色甙元而呈現(xiàn)紅色或紫色反應(個別為淡黃色、橙色、紫色或藍色)。這是由于酮類化合物分子中含有一個堿性氧原子,致能溶于稀酸中被還原成帶四價的氧原子即鋅鹽。本法是鑒別黃酮類的一個反應。但花色素本身在酸性下(不需加鎂粉)呈紅色,應加以區(qū)別。
①此反應僅在化學結(jié)構(gòu)中,第三位上帶羥基的酮醇類顯色較明顯,而其它黃酮烷酮類均不甚明顯。因此試驗呈陰性反慶是不能做出否定的結(jié)論,尚需結(jié)合其他實驗再做結(jié)論。醫(yī)學教|育網(wǎng)|收集整理 ②試驗應在醇中進行,水分多會影響顏色的生成。此反慶較慢,有時需置水浴上加熱,以促使反應的進行。
(2)熒光試驗:
①三氯化鋁試驗:取檢品的乙醇溶液點于濾紙片上(干后再點1次,使其濃度庥中),干后,噴霧1%三氯化鋁乙醇試液,在紫外光燈下觀察,呈現(xiàn)黃色、綠色、橙色等熒光為黃酮類;呈現(xiàn)天藍色或黃綠色;熒光,則為二氫黃酮類。這是區(qū)別二氫黃酮類化合物的一種鑒別反應。
②硼酸丙酮枸櫞酸丙酮試驗:取檢品的乙醇溶液1ml,在沸水浴上蒸干加入飽和硼酸丙酮溶液及10%枸櫞酸丙酮溶液各0.5ml,蒸去丙酮后,在紫外光燈下觀察,管內(nèi)呈現(xiàn)強烈的綠色熒光(黃酮或其甙類)。
(3)堿液試驗:取檢品的乙醇溶液點于濾紙片上(干后,再點一次,使其溶液集中),干后,噴1%碳酸鈉溶液或在氨蒸氣中熏幾分鐘,呈現(xiàn)亮黃、綠或橙黃色。如將氨氣熏過的濾紙露置空氣中,顏色逐漸裉去而變?yōu)樵械念伾S酮或其甙類)。