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副傷寒分子生物學診斷方法

2015-04-09 20:31 醫(yī)學教育網(wǎng)
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副傷寒分子生物學診斷方法:

1.DNA探針(DNAProbe)DNA探針是用DNA制備的診斷試劑,用于檢測或鑒定特定的細菌,方法是用一段已標記的特定的DNA片段(探針)與標本中已變性的細菌DNA雜交,通過測定是否發(fā)生雜交反應(yīng)來達到檢測目的,由于此探針是以細菌專有的特異性基因片斷制備,故特異性很高。用DNA探針對培養(yǎng)所得的傷寒桿菌進行檢測,敏感性需標本中達1000個細菌才能檢出。DNAProbe的特異性高而敏感性低,一般用于菌種鑒定及分離。

2.聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)PCR方法是80年代中后期發(fā)展起來的一種分子生物學方法,它能在數(shù)小時內(nèi)在體外將目標基因或DNA片段擴增到數(shù)百萬倍,檢出率較DNA探針高100~10000倍,JaeHS等用PCR方法擴增傷寒的鞭毛抗原編碼基因,敏感度能檢出10個傷寒菌,特異性為100%,PCR方法因其高度敏感,易出現(xiàn)產(chǎn)物污染,所以控制PCR方法的假陽性及假陰性,是提高準確度的關(guān)鍵。

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