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胚胎干細(xì)胞生物學(xué)特性:
形態(tài)學(xué)特征
ES細(xì)胞具有與早期胚胎細(xì)胞相似的形態(tài)結(jié)構(gòu),細(xì)胞核大,有一個(gè)或幾個(gè)核仁,胞核中多為常染色質(zhì),胞質(zhì)胞漿少,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單。體外培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞排列緊密,呈集落狀生長(zhǎng)。用堿性磷酸酶染色,ES細(xì)胞呈棕紅色,而周圍的成纖維細(xì)胞呈淡黃色。細(xì)胞克隆和周圍存在明顯界限,形成的克隆細(xì)胞彼此界限不清,細(xì)胞表面有折光較強(qiáng)的脂狀小滴。細(xì)胞克隆形態(tài)多樣,多數(shù)呈島狀或巢狀。小鼠ES細(xì)胞的直徑7 μm~18 μm,豬、牛、羊ES細(xì)胞的顏色較深,直徑12 μm~18 μm.
分化
ES細(xì)胞的全能性指ES細(xì)胞在解除分化抑制的條件下能參與包括生殖腺在內(nèi)的各種組織的發(fā)育潛力,即ES細(xì)胞具有發(fā)育成完整動(dòng)物體的能力,可以為細(xì)胞的遺傳操作和細(xì)胞分化研究提供豐富的試驗(yàn)材料。ES細(xì)胞發(fā)育全能性的標(biāo)志是ES細(xì)胞表面表達(dá)時(shí)相專一性胚胎抗原(Stage specific embryonicant,SSEA),而且可以檢查到Oct4基因的表達(dá),這兩種蛋白是發(fā)育全能性的標(biāo)志。ES細(xì)胞中AKP及端粒酶活性較高,可用于ES細(xì)胞分化與否的鑒定。ES細(xì)胞的多能性是指ES細(xì)胞具有發(fā)育成多種組織的能力,參與部分組織的形成。將ES細(xì)胞培養(yǎng)在不含分化抑制物的培養(yǎng)基上,可以形成類胚體。將ES細(xì)胞在特定培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),可以定向分化成特定組織,如ES細(xì)胞在含有白血病抑制因子(LIF)和維生素A酸(RA)的培養(yǎng)基上,可以分化形成全壁內(nèi)胚層,將ES細(xì)胞與胚胎細(xì)胞共培養(yǎng)或?qū)S細(xì)胞注入囊胚腔中,ES細(xì)胞就會(huì)參與多種組織的發(fā)育。
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