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支原體實(shí)驗(yàn)室檢測方法,相信朋友們都想知道,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編整理相關(guān)知識(shí)點(diǎn),供朋友們參考。
支原體實(shí)驗(yàn)室檢測方法有:形態(tài)學(xué)檢查、支原體培養(yǎng)、抗原檢測、血清學(xué)方法和分子生物學(xué)方法。解脲支原體MB抗原的研究表明:MB抗原是解脲支原體感染時(shí)被識(shí)別的主要外膜抗原,具有種特異性,包含血清特異的和交叉反應(yīng)的抗原決定簇。編碼MB抗原的基因長1200多個(gè)堿基、N端1/3為保守區(qū),包含群特異的抗原決定簇:C端2/3是由重復(fù)序列組成的可變區(qū),包含型特異的抗原決定簇,對(duì)該抗原的研究及對(duì)于研究疾病的發(fā)病機(jī)制和免疫機(jī)制起重要作用。MB抗原位于解脲支原體膜的表面,N端固定于膜上使C端重復(fù)區(qū)暴露于微生物周圍的微環(huán)境。N端可以作為其分群分型的基礎(chǔ),C端最可能首先與宿主的防御系統(tǒng)相遇而引起主要的抗體反應(yīng),是理解它的發(fā)病機(jī)制和免疫機(jī)制的基礎(chǔ)。MB抗原與疾病的關(guān)系,以及它在疾病中的作用還有待進(jìn)一步探討。
測定支原體抗體的血清學(xué)試驗(yàn)方法中,有支原體特異性血清學(xué)檢測和非特異性血清學(xué)檢測:支原體特異性血清學(xué)檢測方法中,最常用的是補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn),另有間接免疫熒光染色檢查法、生長抑制試驗(yàn)、代謝抑制試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)、酶免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)等。支原體的非特異血清學(xué)方法有肺炎支原體冷凝集試驗(yàn)與MG鏈球菌凝集試驗(yàn),對(duì)支原體肺炎能起輔助診斷的作用。檢測特異性抗體IgG的方法尚不能達(dá)到早期快速診斷的目的,抗原的檢測為今后研究的發(fā)展方向。目前已有用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、熒光標(biāo)記抗體、肺炎支原體膜蛋白單克隆抗體和反向間接血凝法直接檢測分泌物和體液中支原體抗原的報(bào)道,具有很高的特異度和靈敏度。人體感染肺炎支原體后,能產(chǎn)生特異性IgM和IgG類抗體。IgM類抗體出現(xiàn)早,一般在感染后1周出現(xiàn),3~4周達(dá)高峰,以后逐漸降低。由于肺炎支原體感染的潛伏期為2~3周,當(dāng)患者出現(xiàn)癥狀而就診時(shí),IgM抗體已達(dá)到相當(dāng)高的水平,因此IgM抗體陽性可作為急性期感染的診斷指標(biāo)。如IgM抗體陰性,則不能否定肺炎支原體感染, 需檢測IgG抗體。IgG較IgM出現(xiàn)晚,需動(dòng)態(tài)觀察,如顯著升高提示近期感染,顯著降低說明處于感染后期。 ?PCR技術(shù)檢測為進(jìn)一步早期診斷MP感染提供可能。應(yīng)用PCR的敏感性和探針雜交的特異性合二為一,是目前公認(rèn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性最好的檢測。
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