1.充足的營養(yǎng)：必須有充足的營養(yǎng)物質(zhì)才能為細菌的新陳代謝及生長繁殖提供必需的原料和足夠的能量。

2.適宜的溫度：細胞生長的溫度極限為-7℃～90℃。各類細菌對溫度的要求不同，可分為嗜冷菌（Psychrophiles），最適生長溫度為（10℃～20℃）；嗜溫菌（Mesophiles），20℃～40℃；嗜熱菌（Thermophiles），在高至56℃～60℃生長最好。病原菌均為嗜溫菌，最適溫度為人體的體溫，即37℃，故實驗室一般采用37℃培養(yǎng)細菌。

有些嗜溫菌低溫下也可生長繁殖，如5℃冰箱內(nèi)，金黃色葡萄球菌緩慢生長釋放毒素，故食用過夜冰箱冷存食物，可致食物中毒。

3.合適的酸堿度：在細菌的新陳代謝過程中，酶的活性在一定的PH范圍才能發(fā)揮。多數(shù)病原菌最適PH為中性或弱堿性（pH7.2～7.6）。人類血液、組織液PH為7.4，細菌極易生存。胃液偏酸，絕大從數(shù)細菌可被殺死。個別細菌在堿性條件下生長良好，如霍亂孤菌在PH8.4～9.2時生長最好；也有的細菌最適pH偏酸，如結(jié)核桿菌（pH6.5～6.8）、乳本鄉(xiāng)桿菌（pH5.5）。細菌代謝過程中分解糖產(chǎn)酸，PH下降，影響細菌生長，所以培養(yǎng)基中應(yīng)加入緩沖劑，保持PH穩(wěn)定。

4.必要的氣體環(huán)境：氧的存大與否和生長有關(guān)，有些細菌僅能在有氧條件下生長；有的只能在無氧環(huán)境下生長；而大多數(shù)病原菌在有氧及無氧的條件下均能生存。一般細菌代謝中都需CO2，但大多數(shù)細菌自身代謝所產(chǎn)生的CO2即可滿足需要。有些細菌，如腦膜炎雙球菌在初次分離時需要較高濃度的CO2（5～10%），否則生長很差甚至不能生長。