免疫電泳法與免疫固定電泳
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免疫電泳法
免疫電泳法是指利用凝膠電泳與雙向免疫擴(kuò)散兩種技術(shù)結(jié)合的實驗方法。在電場作用下標(biāo)本中各組分因電泳遷移率不同而分成區(qū)帶,然后沿電泳平行方向?qū)⒛z挖一溝槽,將抗體加入溝槽內(nèi),使抗原與抗體相互擴(kuò)散而形成沉淀線。根據(jù)沉淀線的數(shù)量、位置及形狀,以分析標(biāo)本中所含組分的性質(zhì),本實驗常用于抗原分析及免疫性疾病的診斷。此法在微量的基礎(chǔ)上具有分辨率高,靈敏度高,時間短,是很理想的分離和鑒定蛋白質(zhì)混合物的方法。用于抗原、抗體定性及純度的測定。
免疫固定電泳
免疫固定電泳是一種包括瓊脂凝膠蛋白電泳和免疫沉淀兩個過程的操作。血清IFE可檢測IgG、IgM、IgA等及κ輕鏈、λ輕鏈。原理是將樣本在瓊脂平板上作區(qū)帶電泳,分離后其上覆蓋抗血清濾紙,濾紙分別含抗κ輕鏈、抗λ輕鏈,或抗各類重鏈抗血清,當(dāng)抗體與某區(qū)帶中的單克隆Ig結(jié)合,可形成免疫復(fù)合物沉淀,即固定,再通過漂洗與染色,呈現(xiàn)濃而窄的著色區(qū)帶,即可判別單Ig的輕鏈和重鏈的類別。血清樣本要求使用免疫項目藍(lán)色管采集靜脈血,避免溶血。
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