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考試輔導(dǎo)
我們對重組水蛭素基因工程作了大量系統(tǒng)的研究,具有堅實的技術(shù)基礎(chǔ)。我們從國內(nèi)養(yǎng)殖的醫(yī)用水蛭中克隆出水蛭素的cDNA進行測序,并合成了大腸桿菌偏愛密碼子的水蛭素基因,構(gòu)建了分泌型大腸桿菌表達載體,優(yōu)化表達條件,獲得高效表達,產(chǎn)物直接分泌至跑外,大大簡化了下游工程。我們根據(jù)水蛭素的特性,設(shè)計了適合大規(guī)模生產(chǎn)的低成本的分離純化新工藝,無需高效液相層析或反相層析,只經(jīng)三步純化,即獲得電泳純的產(chǎn)品。目前我們得到水蛭素的表達量、純度和得率均達到國際先進水平。