循環(huán)免疫復(fù)合物的物理測定法:
1.聚乙二醇法:聚乙二醇(PEG)是乙二醇聚合而成的無電荷形多糖分子,分子量變化范圍較大,常用的分子量是6000.用3%~4%濃度的PEG可以選擇性地將大分子免疫復(fù)合物沉淀下來,其作用機制尚不甚清楚醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。將PEG溶液與待檢血清混合,置4℃冰箱過夜后離心,將沉淀物用PEG溶液充分洗滌,重新溶解于0.01mol/L的NaOH中,在波長280nm下測量溶液的吸光度;也可利用散射比濁法直接測定PEG沉淀的免疫復(fù)合物;以不同濃度的熱聚合IgG作為參考標準來計算CIC的含量。
聚乙二醇法簡單易行,可在臨床工作中推廣。但此法易受多種大分子蛋白和溫度的干擾,特異性稍差。PEG法還特別適用于沉淀獲得CIC,再進行解離分析其中的抗原與抗體。
2.冷球蛋白測定:在某些病理情況下,血清中的免疫復(fù)合物具有可逆性冷沉淀的特性,于4℃冰箱中放置1~3天可自發(fā)地沉淀下來(參見第二十六章);此種情況多見于冷球蛋白血癥,所涉及的抗原包括自身的IgG、IgM、核苷酸、腫瘤相關(guān)抗原、腎小管上皮、甲狀腺球蛋白、紅細胞基質(zhì)等,還有外源性抗原如乙肝病毒、EB病毒、巨細胞病毒、牛白蛋白和馬蛋白等。