1.反應速度

大多數(shù)酶促反應是可逆反應，其速度既受底物濃度的影響，也受產(chǎn)物生成量的影響。當?shù)孜餄舛容^高時，在反應的初期，其濃度變化甚微，產(chǎn)物生成量也很少，此時反應速度可看作是恒定的。酶反應動力學中所指速度就是反應的初速度。

2.底物濃度

米氏方程ν=νmax【S】/Km+【S】是反映酶促反應速度與底物濃度關系的方程式，其中Km稱米氏常數(shù)醫(yī)`學教育網(wǎng)搜集整理。

Km值是酶的特征常數(shù)之一，只與酶的性質(zhì)有關，而與酶濃度無關。不同的酶，Km值不同。同一個酶有幾種底物時，則對每一種底物各有一特定的Km值，其中Km值最小的底物一般稱為該酶的最適底物或天然底物。

綜上所述，根據(jù)酶的特性及定量原理，測定酶活力時，必須注意以下幾點：

（1）酶促反應過程中，只有最初一段時間內(nèi)反應速度與酶濃度成正比，隨著反應時間的延長，反應速度即逐漸降低。

（2）要規(guī)定一定的反應條件，如時間、溫度、pH等，并在酶測定過程中保持這些反應條件的恒定，如溫度不得超過規(guī)定溫度的士1℃，pH應恒定。

（3）配制的底物濃度應準確且足夠大，底物液中應加入不抑制該酶活力的防腐劑并保存于冰箱中，以防止底物被分解。

（4）標本要新鮮，由于絕大多數(shù)酶可因久置而活力降低，標本如無法及時測定，應保存于冰箱中。用血漿時，應考慮到抗凝劑對酶反應的影響。有些酶在血細胞、血小板中的濃度比血清高，為此在采血、分離血清時，應注意防止溶血和白細胞的破裂。

（5）在測定過程中，所用儀器應絕對清潔，不應含有酶的抑制物，如酸、堿、蛋白沉淀劑等。