血清淀粉酶除來源于胰腺外,還來源于唾液腺及許多其他組織,所以在淀粉酶活性升高時(shí),同工酶的測定有助于疾病的鑒別診斷。P-同工酶升高或降低時(shí),說明可能有胰腺疾患;S-同工酶的變化可能是源于唾液腺或其他組織。當(dāng)血清淀粉酶活性升高而又診斷不清時(shí),應(yīng)進(jìn)一步測定同工酶以助鑒別診斷。有許多方法可以測定同工酶,瓊酯糖和醋纖膜電泳法都是比較常用的方法。
淀粉酶的測定結(jié)果受方法的影響較大,不同方法參考值亦有所不同,臨床所用方法也較多,因此必須了解所用測定方法和其參考值,才能作出正確的診斷。
作為胰腺疾病尤其是急性胰腺炎診斷的試驗(yàn),淀粉酶測定應(yīng)用已久,試驗(yàn)方法曾屢經(jīng)改進(jìn),已經(jīng)有過200多種方法。其試驗(yàn)基本原理都是把病人的標(biāo)本(含淀粉酶)和作為底物的多糖一起進(jìn)行反應(yīng)后,測定反應(yīng)后的剩余底物或產(chǎn)物來計(jì)算淀粉酶的醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理活性。很久以來一直以淀粉為底物,但由于淀粉來源物質(zhì)不同,其分子結(jié)構(gòu)、分子量變化都很大,因而會(huì)影響到淀粉酶的測定。多年的研究結(jié)果,認(rèn)為從天然物質(zhì)中提取的淀粉分子結(jié)構(gòu)差異很大,不宜用做底物?,F(xiàn)在已經(jīng)改用限定性底物法,即選用結(jié)構(gòu)明確,性質(zhì)穩(wěn)定醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理的小分子低聚糖作為底物,能產(chǎn)生穩(wěn)定的限定性產(chǎn)物,然后測定反應(yīng)產(chǎn)物(發(fā)色團(tuán)或葡萄糖)量來計(jì)算淀粉酶活性。
用做限定性底物的一般有4~7個(gè)葡萄糖(戊糖、庚糖等),并連有發(fā)色團(tuán)如β2-氯-4-硝基酚-G7、ethylidene-G7PNP等。試驗(yàn)中所用的工具酶α-葡糖苷酶來源不同時(shí),其水解淀粉酶作用后產(chǎn)物的程度也不同,也會(huì)影響的測定結(jié)果。
很多陰離子有激活淀粉酶的作用,其中以Cl-,Br-為最強(qiáng)。血清甘油三酯濃度高時(shí),可以抑制淀粉酶活性,應(yīng)將標(biāo)本加以稀釋,以降低其影響。由于Ca2+是淀粉酶分子組成的部分,所以除肝素外,一般抗凝劑如草酸鹽,枸櫞酸鹽等因能與Ca2+結(jié)合,抑制淀粉酶活性而不宜應(yīng)用。
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