外周血單個(gè)核細(xì)胞分離是檢驗(yàn)主管技師考試要求掌握的內(nèi)容,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理相關(guān)內(nèi)容供大家參考。
1.原理:外周血中單個(gè)核細(xì)胞(淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞)的比重與紅細(xì)胞、多核白細(xì)胞及血小板不同,介于1.075~1.090之間,紅細(xì)胞及粒細(xì)胞在1.092左右,血小板在1.030~1.035之間。因而可利用一種比重介于1.075~1.092之間而近于等滲的溶液作密度梯度離心,使一定比重的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布而加以分離。
2.試劑:常用的分層液有Ficoll與Percoll兩種。
(1)Ficoll分層液法:主要用于分離外周血中單個(gè)核細(xì)胞,是一種單次密度梯度離心分離法,其分布由上到下依次為:稀釋的血漿層,單個(gè)核細(xì)胞層,粒細(xì)胞層和紅細(xì)胞層。
(2)Percoll分層液法:是一種連續(xù)密度梯度離心分離法,其分布由上至下依次為:死細(xì)胞層,富含單核細(xì)胞組分層,富含淋巴細(xì)胞的組分層及紅細(xì)胞與粒細(xì)胞組分層。
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