本章重點(diǎn)：

　　基因診斷的定義及常用技術(shù)方法?；蛑委煹亩x、采用方法和基本程序。

　　本章難點(diǎn)：

　　基因診斷與基因治療常用技術(shù)方法的基本原理。

　　一、基因診斷

　　要點(diǎn)：

　　1．基因診斷的概念和特點(diǎn)。

　　2．基因診斷的常用技術(shù)方法：

　?。?）DNA診斷：A核酸分子雜交技術(shù)：核酸分子雜交技術(shù)可用以檢測(cè)樣本中是否存在與探針序列互補(bǔ)的同源核酸序列，建立在該技術(shù)基礎(chǔ)上的基因診斷方法有：①限制性內(nèi)切酶酶譜分析法；②DNA限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析；③等位基因特異寡核苷酸探針（ASO）雜交法。B PCR。C基因測(cè)序

　?。?）RNA診斷：常用方法有RNA點(diǎn)雜交、Northern blotting、定量逆轉(zhuǎn)錄PCR、mRNA差異顯示PCR技術(shù)。

　　3．基因診斷的應(yīng)用

　　基本概念：

　　基因診斷：基因診斷是利用現(xiàn)代分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的技術(shù)方法，直接檢測(cè)基因結(jié)構(gòu)及其表達(dá)水平是否正常，從而對(duì)疾病作出診斷的方法。包括DNA診斷和RNA診斷。DNA診斷是以DNA為檢測(cè)對(duì)象探測(cè)DNA序列中的突變情況。RNA診斷是以mRNA為檢測(cè)對(duì)象的診斷方法，是通過(guò)對(duì)待測(cè)基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行定性、定量分析，確定其剪接、加工的缺陷及外顯子的變異。

　　基本要求：掌握基因診斷的概念，了解基因診斷常用技術(shù)方法。

　　二、基因治療

　　要點(diǎn)：

　　1．基因治療的概念和常用方法：常用方法有基因矯正、基因置換、基因增補(bǔ)、基因失活、引入自殺基因。

　　2．基因治療的基本程序：以間接體內(nèi)療法為例

　?。?）治療性基因的選擇

　?。?）基因載體的選擇

　?。?）靶細(xì)胞的選擇

　?。?）基因轉(zhuǎn)移

　?。?）外源基因表達(dá)的篩檢

　?。?）回輸體內(nèi)

　　3．基因治療的應(yīng)用與展望

　　基本概念：

　　1．基因治療： 目前從廣義上來(lái)講，將某種遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到患者細(xì)胞內(nèi)，使其在體內(nèi)發(fā)揮作用，以達(dá)到治療疾病目的的方法，均稱為基因治療。

　　基本要求：掌握基因治療的概念，了解基因治療采取的方法和基本程序。