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檢驗(yàn)士:《答疑周刊》2021年第10期

2021-03-05 16:44 來(lái)源:醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)
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1.【問(wèn)題】淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞基本相等的兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)是?

【解答】新生兒中性粒細(xì)胞占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)(6~28)×109/L,1周內(nèi)降至5×109/L,第6~9d減至與淋巴細(xì)胞大致相等,隨后淋巴細(xì)胞逐漸增多,嬰兒期以淋巴細(xì)胞數(shù)為主(可達(dá)70%),2~3歲后,淋巴細(xì)胞逐漸減低,中性粒細(xì)胞逐漸增高,4~5歲兩者基本相等,形成中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞2次交叉變化曲線,到青春期時(shí)與成人相同。

2.【問(wèn)題】IRMA和RIA的區(qū)別有哪些?

【解答】IRMA與RIA同屬放射性核素標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù),在方法學(xué)上各具典型性。因此從某種意義上,二者的比較代表了標(biāo)記免疫分析中競(jìng)爭(zhēng)和非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合方法學(xué)特點(diǎn)的比較。

①標(biāo)記物:RIA是以放射性核素標(biāo)記抗原,抗原有不同種類,標(biāo)記時(shí)需根據(jù)其理化和生物學(xué)特性,選用不同的放射性核素和方法;IRMA則是標(biāo)記抗體,為大分子蛋白,性質(zhì)較穩(wěn)定,不同抗體標(biāo)記方法基本相同,標(biāo)記抗體的比活度高,提高了測(cè)定的靈敏度。

②反應(yīng)速率:反應(yīng)速率與反應(yīng)物濃度成正比,IRMA反應(yīng)中,標(biāo)記抗體為過(guò)量,且抗原抗體結(jié)合為非競(jìng)爭(zhēng)性,故反應(yīng)速率比RIA快。

③反應(yīng)原理:RIA為競(jìng)爭(zhēng)抑制性結(jié)合,反應(yīng)參數(shù)與待檢抗原量成反比,IRMA為非競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合,反應(yīng)參數(shù)與待檢抗原濃度呈正相關(guān)。

④特異性:IRMA采用針對(duì)不同抗原決定簇的雙抗體結(jié)合抗原,反應(yīng)不易受交叉反應(yīng)物的干擾,測(cè)定特異性較高。

⑤靈敏度和檢測(cè)范圍:IRMA反應(yīng)中,抗原與抗體屬非競(jìng)爭(zhēng)性,微量抗原能與抗體充分結(jié)合;RIA中標(biāo)記抗原和待檢抗原競(jìng)爭(zhēng),與有限量抗體的結(jié)合不充分,故IRMA測(cè)定的靈敏度明顯高于RIA。此外,由于抗體量大,能結(jié)合較多的抗原量,IRMA用于抗原含量較高標(biāo)本測(cè)定時(shí),結(jié)果也較RIA好,IRMA標(biāo)準(zhǔn)曲線工作范圍較RIA寬1~2個(gè)數(shù)量級(jí)。

⑥其他:RIA所用抗體為多克隆性,因此對(duì)其親和力及特異性要求較高,但用量很少;IRMA為試劑過(guò)量的非競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng),對(duì)抗體親和力的要求不及RIA,但用量大。此外,RIA可以測(cè)定大分子和小分子抗原,但I(xiàn)RMA則只能測(cè)定至少有兩個(gè)抗原決定簇的抗原。

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