方法名稱： 利血平注射液—利血平的測定—分光光度法

應用范圍： 本方法采用分光光度法測定利血平注射液中利血平的含量。

本方法適用于利血平注射液。

方法原理： 供試品加2%枸櫞酸溶液稀釋，用三氯甲烷振搖提取，1%碳酸氫鈉溶液洗滌，再用甲醇稀釋制成供試液，經前處理置紫外可見分光光度計，于390nm波長處測定吸收度，計算出其含量。

試劑： 1. 三氯甲烷

2. 無水乙醇

3. 2%枸櫞酸溶液

4. 1%碳酸氫鈉溶液

5. 甲醇

6. 0.3%亞硝酸鈉溶液的50%甲醇溶液

7. 5%氨基磺酸銨溶液

8. 50%甲醇溶液

儀器設備： 紫外可見分光光度計

試樣制備： 1.對照品溶液的制備

精密稱取利血平對照品25mg，置100mL量瓶中，加三氯甲烷3~4mL使溶解，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液，精密量取2mL，置25mL量瓶中，加三氯甲烷18mL，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

精密量取供試品適量（約相當于利血平5mg），置100mL量瓶中，加2%枸櫞酸溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取10mL，置分液漏斗中，用三氯甲烷振搖提取3次（第一次6mL、第二、三次各5mL），每次振搖2分鐘，分取三氯甲烷液，分別用同一1%碳酸氫鈉溶液10mL振搖洗滌，分取三氯甲烷層置干燥的25mL量瓶中，水層再用三氯甲烷2mL提取1次，提取液并入量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 精密量取對照品溶液與供試品溶液各5mL，分別置10mL量瓶中，各加甲醇2mL、新制的0.3%亞硝酸鈉溶液的50%甲醇溶液1.0mL與鹽酸5滴，搖勻放置30分鐘，各加新制的5%氨基磺酸銨溶液0.50mL，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，放置30分鐘，另取對照品溶液與供試品溶液各5mL，除以50%甲醇溶液1.0mL代替新制的0.3%亞硝酸鈉溶液的50%甲醇溶液外，分別用同一方法處理后作為各自相應的空白，照紫外分光光度法，于波長390nm處測定吸收度。

注：分光光度法應以配制供試品的同批溶劑為對照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長作為測定波長，一般供試品的吸收度讀數，以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸收度后應減去空白讀數，再計算含量。