實驗前后的準(zhǔn)備同GOTT,如已知為糖尿病人則選用饅頭餐代替口服葡萄糖。取血同時進行葡萄糖和胰島素測定。
胰島素測定過去一般采用放射免疫競爭雙抗體-PEG法。用125Ⅰ標(biāo)記的胰島素與標(biāo)本中胰島素一起競爭結(jié)合抗胰島素抗體上的結(jié)合位點,再用第二抗體結(jié)合抗胰島素抗體,以PEG沉淀胰島素與雙抗體的復(fù)合物,并測定沉淀物的放射性計數(shù),計數(shù)的高低與標(biāo)本中胰島素的含量成反比醫(yī)學(xué)教`育網(wǎng)搜集整理。
現(xiàn)在多采用化學(xué)發(fā)光法。即標(biāo)本中的胰島素和包被于固相磁珠或固相上的單克隆抗體及標(biāo)記有酶或電化學(xué)發(fā)光物質(zhì)的單克隆抗體形成雙抗體夾心復(fù)合物,通過磁場或沖洗除去未反應(yīng)的標(biāo)記單克隆抗體,加入酶底物使之顯色或通電使電化學(xué)發(fā)光物質(zhì)形成激發(fā)態(tài)并在衰減時發(fā)射光子,底物顯色強度或發(fā)光強度與胰島素含量成正比。此外還可采用雙位點的時間分辨熒光計測定法。