1.葡萄糖-胰島素釋放試驗概述
糖尿病人血糖升高的主要原因是胰島素的絕對或相對不足。測定空腹,特別是進食后的胰島素水平,通過觀察在高血糖刺激下胰島素的釋放可進一步幫助我們了解胰島β細胞的功能。糖尿病人往往可出現(xiàn)胰島素空腹水平低下,或服糖后胰島素釋放與血糖不同步,高峰后移或胰島素升高水平不夠等現(xiàn)象。
2.方法
實驗前后的準備同GOTT,如已知為糖尿病人則選用饅頭餐代替口服葡萄糖。取血同時進行葡萄糖和胰島素測定醫(yī)學(xué)教`育網(wǎng)搜集整理。
胰島素測定過去一般采用放射免疫競爭雙抗體-PEG法。用125Ⅰ標記的胰島素與標本中胰島素一起競爭結(jié)合抗胰島素抗體上的結(jié)合位點,再用第二抗體結(jié)合抗胰島素抗體,以PEG沉淀胰島素與雙抗體的復(fù)合物,并測定沉淀物的放射性計數(shù),計數(shù)的高低與標本中胰島素的含量成反比。
現(xiàn)在多采用化學(xué)發(fā)光法。即標本中的胰島素和包被于固相磁珠或固相上的單克隆抗體及標記有酶或電化學(xué)發(fā)光物質(zhì)的單克隆抗體形成雙抗體夾心復(fù)合物,通過磁場或沖洗除去未反應(yīng)的標記單克隆抗體,加入酶底物使之顯色或通電使電化學(xué)發(fā)光物質(zhì)形成激發(fā)態(tài)并在衰減時發(fā)射光子,底物顯色強度或發(fā)光強度與胰島素含量成正比。此外還可采用雙位點的時間分辨熒光計測定法。