1.外周血單個核細胞的分離原理：外周血中單個核細胞（淋巴細胞和單核細胞）的比重與紅細胞、多核白細胞及血小板不同，介于1.075～1.090之間，紅細胞及粒細胞在1.092左右，血小板在1.030～1.035之間。因而可利用一種比重介于1.075～1.092之間，而近于等滲的溶液作密度梯度離心，使一定比重的細胞按相應(yīng)密度梯度分布而加以分離。

　　2.試劑：常用的分層液有Ficoll與Percoll兩種。

　　（1）Ficoll分層液法：主要用于分離外周血中單個核細胞，是一種單次密度梯度離心分離法，其分布由上到下依次為：稀釋的血漿層，單個核細胞層，粒細胞層和紅細胞層。Ficoll分層液即聚蔗糖-泛影葡胺，是一種較理想的細胞分層液，其主要成分是一種合成的蔗糖聚合物，具有高密度、低滲透壓、無毒性的特點。操作時，將分層液置于試管下層，然后將肝素化的全血或白細胞懸液以Hanks或PBS液稀釋后，輕輕鋪于分層液面上，經(jīng)2000rpm15-20min離心后，紅細胞與粒細胞因比重醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理大于分層液，故較快沉于管底。血小板則比重小于分層液而懸浮于血漿中。唯有與分層液比重相當?shù)膯魏思毎土馨图毎芗谘獫{層和分層液的界面中。其分布由上到下依次為：稀釋的血漿層，單個核細胞層，粒細胞層和紅細胞層。

　?。?）Percoll分層液法：是一種連續(xù)密度梯度離心分離法，其分布由上至下依次為：死細胞層，富含單核細胞組分層，富含淋巴細胞的組分層及紅細胞與粒細胞組分層。